The effect of Pinus sylvestris L. plantings on the components activity of legumes antioxidant system

Full Text

Введение

Насаждения Pinus sylvestris L., изменяя водный, тепловой и световой режим биогеоценоза, негативно влияют на растительность нижних ярусов. Для подкроновой зоны сосны характерны сглаженный температурный режим, низкая освещенность, формирование обильного подроста и накопление подстилки. В прикроновой зоне с высокой увлажненностью формируется развитый моховой покров, очень низкое развитие подроста. Внешняя зона характеризуется развитым травянистым покровом, обилием видов и куртинным размещением подроста P. sylvestris L. Аллелопатические ингибирующие эффекты сосны обыкновенной воздействуют на рост и развитие травянистых растений и описаны многими исследователями [1–4]. В первую очередь происходят физиолого-биохимические изменения в растениях, при этом повреждаются мембранные структуры и активизируются многие компоненты антиоксидантной защиты. Среди них особое место занимают низкомолекулярные антиоксиданты, в том числе аскорбиновая кислота и пероксидаза. В последнее десятилетие в научных журналах активизирована публикация работ, связанных с изучением содержания антиоксидантов в растениях [5–11]. Некоторые авторы отмечают повышение активности пероксидазы при окислительном стрессе, в том числе в листьях бобовых растений [12–14]. Существенное влияние на содержание вторичных метаболитов в тканях растений оказывают сезонные стадии развития растений и их возраст. Молодые растения накапливают наибольшее количество вторичных метаболитов по сравнению с растениями репродуктивного возраста [15]. Содержание аскорбиновой кислоты в бобовых растениях по мере их роста и развития постепенно увеличивается, т.к. усиливаются синтетические процессы в листьях, связанные с образованием репродуктивных органов растений [16–18]. В период цветения и плодоношения концентрация аскорбиновой кислоты в листьях резко падает. Максимальное количество аскорбиновой кислоты содержится в наиболее активных частях растений: в листовой пластинке и молодой завязи, в подземных частях её мало или вовсе нет [19]. Однако недостаточно сведений о влиянии сосны обыкновенной на активность антиоксидантов у бобовых растений в природных экосистемах.

Цель работы – оценка влияния насаждений Pinus sylvestris L. на активность компонентов антиоксидантной системы у бобовых растений.

Объекты и методы исследований

Объектом исследований служили растения семейства бобовых (Fabaceae) – донник лекарственный (Melilotus officinalis L.) и амория ползучая (Amoria repens (L.) C. Presl.). Эксперимент проведен в летний период 2018–2019 гг. на территории Кузбасского ботанического сада. Поставлен вегетационный опыт методом Фитомеров – выращивание контрольных видов растений в лизиметрах с устранением эффекта других факторов среды (освещенности, увлажнения, прямой конкуренции и др.). Пробы почв были взяты в фитогенных зонах Pinus sylvestris L., произрастающей на территории породного отвала Кедровского угольного разреза: подкроновая – ПП 1, прикроновая – ПП 2. Преобладающей фракцией почв на отвале являются крупные агрегаты (от 3 до 10 и более мм), содержание мелких частиц снижено. В качестве контроля взята внешняя зона – ПП 3 (к), отдельно растущей сосны обыкновенной. В почву каждой зоны высевали по 100 семян бобовых растений. Отбор проб для анализа отбирали по фазам вегетации: начало вегетации, ветвление, бутонизация, цветение и плодоношение.

Климатические условия вегетационного периода 2018 года характеризовались понижением температуры воздуха (ниже нормы на 4,2°C) и увеличением влажности (198% от нормы) в начале и в середине вегетации (температура ниже нормы на 1,0°C, влажность – 153% от нормы). К концу вегетационного периода среднемесячная температура составила +9,6°C, что превысило норму на 1,1°C, осадков выпало 51 мм (124% от нормы). В 2019 году отмечалось также понижение температуры воздуха в начале и середине вегетации. В мае среднемесячная температура воздуха составила +10,1°C, что ниже нормы на 1,1°C. Осадков выпало 39 мм (99% от нормы). В июле отмечалось понижение температуры (на 0,4°C ниже нормы), в августе – ее повышение (на 1,7°C выше нормы). Осадков выпало в этот период 64–70 мм, что составило 97–103% от нормы.

На проростках определяли содержание аскорбиновой кислоты титриметрическим методом с применением 2,6-дихлорфенолиндофенола натрия [20]; активность пероксидазы – методом А.Н. Бояркина [21]. Повторность опытов трехкратная из смешанной пробы. Данные представлены в виде средних арифметических значений и их среднеквадратических (стандартных) ошибок, рассчитан коэффициент вариации, проведен корреляционный анализ. Экспериментальные данные обработаны статистически с помощью компьютерных программ Microsoft Office Excel 2007 и Statistica 10.

Результаты и их обсуждение

Агрохимический состав почв является одним из наиболее существенных факторов, оказывающих глубокое влияние на обмен веществ в растениях. Результаты агрохимических анализов показали, что почвы на площадках наблюдений характеризовались нейтральной реакцией солевой вытяжки (рН 6,5–7,1) (табл. 1). Согласно шкале Ф.В. Чирикова [22], обеспеченность подвижными формами фосфора: на всех площадках характеризуется как низкая и варьирует в пределах 24–49 мг/кг. Отмечается тенденция увеличения содержания подвижного фосфора по мере увеличения от внешней зоны фитогенных полей к внутренним.

Содержание общего азота на всех ПП по шкале Г.П. Гамзикова [23] варьирует от 0,31 до 0,38%, сумма поглощенных оснований – 21,6–48,4 ммоль/100 г, обменного калия – в пределах 160–180 мг/кг и соответствует высокому уровню [24], причем в прикроновой зоне отмечены минимальные показатели. Содержание органического вещества соответствует уровню высокогумусных почв и составляет 11,4–14,1%.

Сравнительный анализ агрохимических показателей почвы под насаждениями P. sylvestris показал, что рН сдвигается в нейтральную сторону, а более высокие показатели изучаемых параметров (подвижный фосфор, обменный калий, азот общий, органическое вещество) характерны для пробных площадок под деревьями подкроновой и прикроновой зон, в сравнении с контролем. Известно, что со снижением содержания гумуса в почве следует снижение содержания азота, и наоборот. Так, в прикроновой зоне отмечен максимальный уровень органического вещества – 14,1%, при этом массовая доля общего азота составила 0,38%; во внешней зоне – минимальный уровень органического вещества (11,4%), доля общего азота – 0,31%.

Важная роль в период роста и развития растений принадлежит вторичным метаболитам – пероксидазе и аскорбиновой кислоте, которые принимают участие в процессах фотосинтеза и дыхания. Анализ проведенных исследований показал, что активность пероксидазы и содержание аскорбиновой кислоты в листьях бобовых растений, произрастающих в различных фитогенных зонах P. sylvestris, зависели от видовых особенностей и вегетационного периода растений.

Ферментативная активность в течение вегетации в листьях амории ползучей выше, чем в листьях донника лекарственного. По мере роста и развития растений уровень пероксидазы возрастает (рис. 1).

 

Таблица 1 – Агрохимические показатели почвы на исследуемых площадках (глубина отбора проб 0–20 см)

Наименование показателей	Подкроновая зона	Прикроновая зона	Внешняя зона (контроль)
рHсолевая, ед. pH	6,6 ± 0,1	6,5 ± 0,1	7,1 ± 0,1
Органическое вещество, %	13,7 ± 1,4	14,1 ± 1,4	11,4 ± 1,1
P2O5, мг/кг	49 ± 7	41 ± 6	24 ± 4
K2O, мг/кг	180 ± 18	160 ± 16	165 ± 17
N общий, %	0,35 ± 0,02	0,38 ± 0,03	0,31 ± 0,02
Сумма поглощенных оснований, ммоль/100 г	29,6 ± 4,4	21,6 ± 3,2	48,4 ± 7,3

 

Рисунок 1 – Динамика активности пероксидазы в листьях бобовых растений в течение вегетации

 

Рисунок 2 – Содержание аскорбиновой кислоты в листьях бобовых растений в течение вегетации

 

У донника лекарственного в начале вегетации, во время активного роста листьев, происходит снижение активности пероксидазы до фазы бутонизации (от 3,34 до 1,70 ед. активности), затем, по мере старения листьев – ее увеличение (до 14,65 ед. активности). У амории ползучей отмечена такая же закономерность.

Сравнительная характеристика исследуемых растений на пробных площадках показала некоторые отличия по ферментативной активности. Минимальные показатели отмечены у бобовых растений в подкроновой зоне (ПП 1), их варьирование составило у донника лекарственного от 1,70 до 9,26, у амории ползучей – 7,71–46,67 ед. активности, что ниже в среднем на 25–38% относительно контроля.

Содержание аскорбиновой кислоты в бобовых растениях по мере их роста и развития постепенно меняется в сторону увеличения, затем, в результате старения листьев, ее количество уменьшается. В период подготовки к цветению (фаза бутонизации) количество аскорбиновой кислоты достигает максимума (28,13–33,73 мг/100 г). Во время цветения и плодоношения в вегетативных частях бобовых растений данного метаболита становится меньше (3,11–10,22 мг/100 г), так как она накапливается в генеративных частях растений (рис. 2).

Установлено, что наибольшее количество аскорбиновой кислоты содержится в листьях донника лекарственного (7,11–33,73 мг/100 г), чем у амории ползучей (3,11–28,13 мг/100 г) во все сроки наблюдений. У донника лекарственного максимальное содержание витамина С отмечалось в подкроновой зоне, в сравнении с другими исследуемыми площадками. Так, значения варьировали от 10,22 до 33,33 мг/100 г и превысили в среднем на 28% контроль. У амории ползучей более высокими показателями характеризовались растения, произрастающие в прикроновой зоне P. sylvestris, относительно контроля. Уровень аскорбиновой кислоты находился в пределах от 5,67 до 28,13 мг/100 г, что превышало в среднем на 17% контрольные значения.

Анализ значений коэффициентов вариации антиоксидантных компонентов выявил большую однородность показателей аскорбиновой кислоты, т.е. меньшую изменчивость признака по сравнению с активностью пероксидазы. Оценка вариабельности вторичных метаболитов выявила отличия коэффициентов вариации, рассчитанных для различных видов растений. У донника лекарственного разрыв в изменчивости аскорбиновой кислоты уменьшался в 1,4 раза, в сравнении с аморией ползучей. У амории ползучей выявлена меньшая изменчивость пероксидазной активности в 1,1 раз, чем у донника лекарственного.

На основе полученных экспериментальных данных проведен расчет корреляционных связей между агрохимическими свойствами почв под насаждениями P. sylvestris на исследуемых площадках и антиоксидантных компонентов (табл. 2).

Наиболее тесная отрицательная связь у бобовых растений обнаружена между активностью пероксидазы и органическим веществом, подвижным фосфором; между пероксидазой и суммой поглощенных оснований отмечена положительная корреляция. Между аскорбиновой кислотой и агрохимическим показателями установлена обратная зависимость. Положительная корреляция у бобовых растений установлена между аскорбиновой кислотой и органическим веществом, подвижным фосфором; отрицательная корреляция – между аскорбиновой кислотой и суммой поглощенных оснований.

 

Таблица 2 – Корреляционные связи антиоксидантных компонентов с агрохимическими свойствами почвы (2017–2019 гг.)

Наименование показателей	Активность пероксидазы		Аскорбиновая кислота
	M. officinalis	А. repens	M. officinalis	А. repens
рHсолевая, ед. pH	–0,16	–0,12	–0,28	–0,24
Органическое вещество, %	–0,39	–0,32	0,32	0,28
P2O5, мг/кг	–0,43	–0,35	0,34	0,31
K2O, мг/кг	–0,35	–0,30	0,26	0,21
N общий, %	–0,35	–0,28	0,28	0,24
Сумма поглощенных оснований, ммоль/100 г	0,37	0,32	–0,29	–0,25

Примечание. Отмеченные корреляции значимы на уровне р < 0,05, N = 90.

 

Выводы

1. Насаждения Pinus sylvestris L. оказывают существенное влияние на накопление вторичных метаболитов в листьях бобовых растений в течение вегетации. Содержание аскорбиновой кислоты у бобовых растений по мере их роста и развития увеличивается, затем, в результате старения листьев, ее количество уменьшается. По содержанию пероксидазы выявлена обратная зависимость.
2. Исследованиями установлено, что активность компонентов антиоксидантной системы зависит от видовых особенностей растений: у амории ползучей выше, чем у донника лекарственного.
3. Исследуемые образцы характеризовались наименьшей вариабельностью по содержанию аскорбиновой кислоты, в сравнении с активностью пероксидазы. У донника лекарственного разрыв в изменчивости аскорбиновой кислоты уменьшался в 1,4 раза, в сравнении с аморией ползучей.
4. Наиболее тесная отрицательная связь у бобовых растений обнаружена между активностью пероксидазы и органическим веществом, подвижным фосфором; между пероксидазой и суммой поглощенных оснований отмечена положительная корреляция, что указывает на возможность использования полученных данных в качестве диагностических признаков состояния растений для мониторинга природных экосистем.

About the authors

Elena Yu. Kolmogorova

Institute of Human Ecology of Federal Research Center of Coal and Coal Chemistry of the Siberian Branch of the Russian Academy of Sciences

Author for correspondence.
Email: kolmogorova_elena@bk.ru

candidate of biological sciences, researcher of Reclamation and Biomonitoring Laboratory

Russian Federation, Kemerovo

Oksana L. Tsandekova

Institute of Human Ecology of Federal Research Center of Coal and Coal Chemistry of the Siberian Branch of the Russian Academy of Sciences

Email: zandekova@bk.ru

candidate of agricultural sciences, researcher of Reclamation and Biomonitoring Laboratory

Russian Federation, Kemerovo

References

Supplementary files