Email this article 
Ecological diversity of some resource medicinal mushrooms of the genus Pleurotus in the Novosibirsk Region
- Authors: Vlasenko V.A.1, Asbaganov S.V.1, Vlasenko A.V.1
-
Affiliations:
- Central Siberian Botanical Garden of Siberian Branch of Russian Academy of Sciences
- Issue: Vol 8, No 4 (2019)
- Pages: 34-38
- Section: General Biology
- URL: https://snv63.ru/2309-4370/article/view/34453
- DOI: https://doi.org/10.17816/snv201984106
- ID: 34453
Cite item
Full Text
Abstract
In this paper the authors reveal features of substrate specialization and habitats distribution of the biotechnologically valuable medicinal resource species of Pleurotus pulmonarius mushrooms in the Novosibirsk Region. The authors show the distribution of the species on deciduous and coniferous tree species, in connection with substrate specificity, distribution in habitats and seasonal features of fructification formation. The studied species is confined mainly to deciduous trees; it was noted only once on Abies sibirica. In general, P. pulmonarius was recorded on 5 species of deciduous trees, most of the samples were collected on Betula pendula and Populus tremula. Less often the fungus is found on Sorbus sibirica, Populus sp., Acer negundo, Tilia cordata, Salix alba. P. pulmonarius develops in zonal small-leaved and mixed forests most often, it is rarely found in river floodplains and near-river communities. Quite often the fungus is found in artificial plantations, where it is one of the most common wood-decay fungi of anthropogenic habitats. Fructification of P. pulmonarius in the Novosibirsk Region occurs from May to October, its peak activity is in late summer – early fall (August-September).
Full Text
Актуальность
Грибы имеют огромное значение в природе и жизни человека. Например, ксилотрофные грибы образуют экологические ниши для обитания множества других организмов – миксомицетов, насекомых, птиц, млекопитающих. Они определяют основные параметры биологического разложения древесины. Обладая комплексом специфических ферментативных систем, грибы играют одну из главных ролей по утилизации древесины – крупнейшего резервуара биологически связанного углерода, обеспечивая тем самым круговорот веществ и трансформацию энергии в лесных экосистемах. Сообщества дереворазрушающих грибов являются обязательным элементом сообществ древесных и кустарниковых растений, объективно отражают общие закономерности развития леса и его состояние. Некоторые виды являются возбудителями стволовых и корневых гнилей древесных растений, принося тем самым значительный вред лесному хозяйству. Домовые грибы способны за короткое время разрушать деревянные строения [1].
С точки зрения пользы для человека грибы становятся все более важным компонентом в диете из-за их питательных характеристик. Высокое содержание белка, необходимых питательных веществ и низкое содержание калорий делают их отличной пищей. Помимо использования в качестве источника пищи, грибы применяются как полезные для здоровья пищевые добавки [2; 3].
Базидиомицеты содержат широкий спектр различных лекарственных веществ, такие как полисахариды, органические кислоты, липиды, стероиды, тетрациклические тритерпены, которые представляют интерес для медицинского использования [4–6].
Экстракты из грибов показывают разную степень биологической активности. Это может быть связано как с биологическими особенностями конкретных штаммов грибов изученных видов, так и с их экологическими особенностями – известно, что при выращивании грибов на различных субстратах содержание биоактивных компонентов может отличаться.
В настоящем исследовании мы провели анализ экологического разнообразия ресурсного лекарственного вида грибов – P. pulmonarius Новосибирской области с целью выявления экологических закономерностей распределения данного вида по типам субстратов и местообитаний в Новосибирской области.
В настоящее время все еще остается малоизученной экология данного вида, особенно в лесах лесостепной зоны юга Западно-Сибирской равнины. В связи с этим изучение особенностей распределения данного вида по типам субстратов и местообитаний является актуальным, данная работа призвана частично восполнить имеющиеся пробелы. Полученные в процессе работы данные по экологии вида будут полезны специалистам в области микробиологии и биотехнологии для поиска высокопродуктивных штаммов P. pulmonarius.
Объект исследования
Род вешенка – Pleurotus включает некоторые наиболее популярные съедобные грибы благодаря их благоприятным органолептическим и лекарственным свойствам, быстрому росту при их культивировании и нетребовательным условиям выращивания [7]. Плевротоидные грибы можно культивировать на широком разнообразии продуктов агролесоводства, сорняках и отходах для производства продуктов питания, кормов, ферментов и лекарственных соединений [8–10].
Виды рода Pleurotus использовались людьми во всем мире из-за их питательной ценности, лечебных свойств и других полезных эффектов. Вешенки являются хорошим источником пищевых волокон и других ценных питательных веществ. Они также содержат ряд биологически активных соединений с терапевтической активностью [11].
Вешенки обладают лечебными свойствами, содержащиеся в них полисахариды проявляют высокий противоопухолевый, антиоксидантный, иммуномодулирующий, противовирусный и другие эффекты [12].
В природе вешенки широко распространены и развиваются в качестве сапротрофов или факультативных ксилосапротрофов многих пород древесных растений, чаще всего лиственных, но могут расти и на хвойных. В городских посадках P. pulmonarius является одним из самых часто встречающихся видов грибов, развивается на пнях, сухостое или на старых ослабленных деревьях.
Материалы и методика исследований
Цель работы – изучить экологическое разнообразие ресурсного лекарственного вида P. pulmonarius Новосибирской области, провести анализ субстратной приуроченности и распределения по типам местообитаний.
Район исследования расположен в Азиатской части России и находится в пределах трех природных зон – таежной, лесостепной и степной.
Плодовые тела грибов собирали в процессе экспедиционных исследований в Новосибирской области. Кроме естественных лесных сообществ были также обследованы антропогенные местообитания, с представленными в них искусственными насаждениями и остатками естественных растительных сообществ в пределах г. Новосибирска.
Высушенные образцы были сохранены в гербарии. Информация по субстратной приуроченности и местообитаниям грибов была занесена в базу данных Excel и использована в настоящем исследовании.
Для корректного проведении анализа экологического разнообразия было необходимо провести точную идентификации видовой принадлежности образцов грибов. В связи с тем, что виды рода Pleurotus отличаются широким диапазоном морфологической изменчивости, для идентификации были применены методы молекулярно-генетических исследований.
Фрагмент грибковых плодовых тел (50 мкг) гомогенизировали в 300 мкл лизирующего буфера и использовали экстракт ДНК с помощью набора NucleoSpin Plant II. Область рДНК ITS1–5.8S-ITS2 была амплифицирована с помощью ПЦР с праймерами ITS1F и ITS4B. Для ПЦР использовали ДНК-полимеразу HS Taq («Евроген», Москва). ПЦР проводили в термоциклере C1000 (Bio-Rad, США). Результаты ПЦР проверяли в Gel Doc XR + Imager (Bio-Rad, США). Секвенирование ампликонов ДНК проведено в ЦКП Геномика СО РАН (Новосибирск, Россия).
Для молекулярно-генетических исследований были отобраны 7 образцов, включая 2 образца, с нетипичными для P. pulmonarius морфотипами (NSK 1014216, NSK 1014217).
В результате мы получили 7 новых последовательностей для региона ITS1–5.8S-ITS2 для изученных нами образцов плодовых тел грибов рода Pleurotus. Дополнительные 8 ITS последовательностей видов рода Pleurotus были отобраны нами на основе результатов BLAST анализа и получены из GenBank (https://www.ncbi.nlm.nih.gov/genbank).
Итоговый набор данных состоял из 15 последовательностей ITS. Обзор всех таксонов и последовательностей, используемых для реконструкции дерева, включая названия видов, гербарные образцы / штаммы и номера доступа Genbank, приведенные в табл. 1.
Таблица 1 – Последовательности, использованные при выравнивании
Виды | Гербарный образец / Культура | Номер Genbank |
Pleurotus cf. pulmonarius | NSK 1014216 | MN179415 |
Pleurotus cf. pulmonarius | NSK 1014217 | MN179416 |
Pleurotus pulmonarius | NSK 1014218 | MN179417 |
Pleurotus pulmonarius | NSK 1014214 | MN179418 |
Pleurotus pulmonarius | NSK 1014279 | MN179419 |
Pleurotus pulmonarius | NSK 1014280 | MN179420 |
Pleurotus pulmonarius | NSK 1014215 | MN179421 |
Pleurotus pulmonarius | FPPMK-L | JX429930 |
Pleurotus pulmonarius | ATCC 62887 | JX535494 |
Pleurotus pulmonarius | UNIP30 | KT273376 |
Pleurotus pulmonarius | DMRP-10 | MG819729 |
Pleurotus ‘sajor-caju’ | H-1 | JQ837470 |
Pleurotus cf. eryngii | C1 | FJ514549 |
Pleurotus ostreatus | 6689 | AY450345 |
Pleurotus populinus | 9936 | AY450346 |
Нуклеотидные последовательности ITS выравнивали с использованием метода ClustalW [13]. в MEGA 7 [14]. Реконструкция филогении была сделана с использованием метода UPGMA [15]. Процент дублирующих деревьев, в которых связанные таксоны, сгруппированные вместе в тесте начальной загрузки (100 повторов), показаны рядом с ветвями. Эволюционные расстояния были рассчитаны с использованием метода максимального составного правдоподобия [16] и выражены в единицах количества базовых замен на сайте. Различия в смещении состава между последовательностями были рассмотрены в эволюционных сравнениях [17]. Все неоднозначные позиции были удалены для каждой пары последовательностей (опция парного удаления). Всего в итоговом наборе данных было 609 позиций. Эволюционный анализ был проведен в MEGA 7.
Результаты исследования и их обсуждения
В результате исследований, проведенных в течение 2018–2019 гг. было собрано 39 образцов грибов P. pulmonarius. На основе проведенного экологического анализа выявлены особенности распределения видов по типам субстратов и местообитаниям.
Плодовые тела вида P. pulmonarius отличаются широким диапазоном морфологической изменчивости. Нами были выделены 3 основных морфотипа (рис. 1). Определенные морфологические типы плодовых тел оказались характерны для определенных пород деревьев и топических групп грибов, выделяемых на основе способа расположения плодовых тел на субстрате [18].
Морфотип 1 характеризуется практически агарикоидной жизненной формой, с отрицательно-гравитропическими плодовыми телами с длинными ножками.
Морфотип 2 характеризуется типичной плевротоидной жизненной формой с латерально-прикрепленными плодовыми телами с короткой боковой, иногда практически редуцированной ножкой.
Морфотип 3 характеризуется плевротоидной жизненной формой с латерально-прикрепленными сидячими плодовыми телами с полностью редуцированной ножкой.
На основе сравнительно-морфологического анализа плодовых тел и микроструктур некоторые из изученных образцов были отнесены нами к Pleurotus ostreatus. Но проведенный молекулярно-филогенетический анализ показал, что все изученные образцы рода Pleurotus Новосибирской области относятся к P. pulmonarius (рис. 2).
Рисунок 1 – Морфотипы Pleurotus pulmonarius Новосибирской области, характерные для конкретных субстратов – пород древесных растений. 1, 2 – отмечен на Betula pendula, Populus tremula. 3, 4 – отмечен на Sorbus sibirica, Betula pendula, Populus tremula, Tilia cordata, Acer negundo, Abies sibirica. 5, 6 – отмечен на Populus sp., Salix alba
Рисунок 2 – Дерево UPGMA на основе ITS-последовательностей, показывающее филогенетические связи P. pulmonarius из Новосибирской области с другими родственными видами рода Pleurotus
Выводы
P.pulmonariusразвивается на древесине, поэтому главным фактором, лимитирующим распространение вида, является субстрат. Субстратная приуроченность данного вида связана с широким спектром пород деревьев, что характеризует его как трофически-пластичного.
Анализ распределения вида P. pulmonarius по типам субстрата показал, что данный гриб приурочен преимущественно к лиственным породам деревьев, единственный раз на хвойных в изученном регионе вид отмечен на Abies sibirica. Наиболее часто вид встречается на лиственных деревьях.
В целом, P. pulmonarius отмечен на 5 породах лиственных деревьев, из которых большинство образцов собрано на Betula pendula (отмечен 16 раз), Populus tremula (отмечен 8 раз), Sorbus sibirica (отмечен 6 раз), Populus sp (отмечен 3 раза), Acer negundo (отмечен 2 раза), Tilia cordata (отмечен 2 раза), Salix alba (отмечен 1 раз).
Анализ распределения вида P. pulmonarius по типам местообитаний показал, что наиболее частая встречаемость P. pulmonarius характерна для смешанных березово-сосновых (отмечен 8 раз), березовых (отмечен 8 раз), осиновых (отмечен 8 раз) лесов. Изредка гриб отмечается в поймах рек и прирусловых сообществах (отмечен 2 раза). Довольно часто гриб обнаруживается в искусственных посадках – ботанические сады и в городские насаждения, где он характеризуется частой встречаемостью (отмечен 13 раз). При анализе была учтена встречаемость вида за 2-летний период исследований во всех естественных местообитаниях гриба на территории Новосибирской области, а также во всех антропогенных местообитаниях на территории г. Новосибирска, за весь период плодоношения вида.
Фенологический анализ показал, что плодоношение P. pulmonarius в Новосибирской области происходит с мая по октябрь. При этом наиболее активно P. pulmonarius плодоносит в конце лета – начале осени. Наиболее часто данный вид отмечается в сентябре (отмечен 14 раз) и августе (отмечен 12 раз). Реже гриб отмечается в июле (отмечен 4 раза), в октябре (отмечен 3 раза), июне (отмечен 2 раза) и в мае (отмечен 1 раз).
About the authors
Vyacheslav Aleksandrovich Vlasenko
Central Siberian Botanical Garden of Siberian Branch of Russian Academy of Sciences
Author for correspondence.
Email: vlasenkomyces@mail.ru
candidate of biological sciences, senior researcher of Lower Plants Laboratory
Russian Federation, NovosibirskSergey Valentinovich Asbaganov
Central Siberian Botanical Garden of Siberian Branch of Russian Academy of Sciences
Email: cryonus@mail.ru
candidate of biological sciences, researcher of Introduction of Food Plants Laboratory
Russian Federation, NovosibirskAnastasiya Vladimirovna Vlasenko
Central Siberian Botanical Garden of Siberian Branch of Russian Academy of Sciences
Email: anastasiamix81@mail.ru
candidate of biological sciences, senior researcher of Lower Plants Laboratory
Russian Federation, NovosibirskReferences
- Vlasenko V.A. Substrate specialization of Wood-decay Aphyllophoroid fungi in the pine forest of the Right Riverside of the Ob Headwaters // Contempor. Prob. Ecol. 2009. Vol. 2, № 6. P. 620–624.
- Barros L., Baptista P., Correia D.M., Morais J.S., Ferreira I.C.F.R. Effects of conservation treatment and cooking on the chemical composition and antioxidant activity of Portuguese wild edible mushrooms // J. Agric. Food Chem. 2007. Vol. 55. P. 4781–4788.
- Ogbe A.O., Mgbojikwe L.O., Owoade A.A., Atawodi S.E., Abdu P.A. The effect of a wild mushroom (Ganoderma lucidum) supplementation as feed on the immune response of pullet chickens to Infectious Bursal Disease Vaccine // EJEAFChe. 2008. Vol. 7. P. 2844–2855.
- Lindequist U., Niedermeyer T.H.J., Jülich W.D. The pharmacological potential of mushrooms // Evid. Based. Complement. Alternat. Med. 2005. Vol. 2, № 3. P. 285–299.
- Wasser S.P. Medicinal mushroom science: history, current status, future trends, and unsolved problems // Int. J. Med. Mushr. 2010. Vol. 12. P. 1–16.
- Teplyakova T.V., Psurtseva N.V., Kosogova T.A., Mazurkova N.A., Khanin V.A., Vlasenko V.A. Antiviral activity of polyporoid mushrooms (higher basidiomycetes) from Altai Mountains (Russia) // Int. J. Med. Mushr. 2012. Vol. 14, № 1. P. 37–45.
- Gregori A., Svagelj M., Pohleven J. Cultivation techniques and medicinal properties of Pleurotus spp. Food Technol. Biotechnol. 2007. Vol. 45, № 3. P. 238–249.
- Isikhuemhen O.S., Nerud F., Vilgalys R. Cultivation studies on wild and hybrid strains of Pleurotus tuber-regium (Fr.) Sing. on wheat straw substrate // World J. Microbiol. Biotechnol. 2000. Vol. 16. P. 431–435.
- Stamets P. Growing gourmet and medicinal mushrooms. Ten Speed Press Berkeley USA. 2000. 554 p.
- Das N., Mukherjee M. Cultivation of Pleurotus ostreatus on weed plants // Bioresour. Technol. 2007. Vol. 98. P. 2723–2726.
- Çaglarırmak N. The nutrients of exotic mushrooms (Lentinula edodes and Pleurotus species) and an estimated approach to the volatile compounds // Food Chem. 2007. Vol. 105. P. 1188–1194.
- Vlasenko V.A., Vlasenko A.V. Antiviral activity of fungi of the Novosibirsk Region: Pleurotus ostreatus and P. pulmonarius (Review) // BIO Web Conf. 2018. Vol. 11. All-Russia Scientific-Practical Conference «Prospects of Development and Challenges of Modern Botany». P. 1–4. doi: 10.1051/bioconf/20181100044.
- Higgins D., Thompson J., Gibson T., Thompson J.D., Higgins D.G., Gibson T.J. CLUSTAL W: improving the sensitivity of progressive multiple sequence alignment through sequence weighting, position-specific gap penalties and weight matrix choice // Nucleic Acids Res. 1994. Vol. 22. P. 4673–4680.
- Kumar S., Stecher G., Li M., Knyaz C., Tamura K. MEGA X: Molecular Evolutionary Genetics Analysis across computing platforms // Molecular Biology and Evolution. 2018. Vol. 35. P. 1547–1549.
- Sneath P.H., Sokal R.R. Numerical Taxonomy. San Francisco: Freeman, 1973. 573 p.
- Tamura K., Nei M., Kumar S. Prospects for inferring very large phylogenies by using the neighbor-joining method // Proceedings of the National Academy of Sciences (USA). 2004. Vol. 101. P. 11030–11035.
- Tamura K., Kumar S. Evolutionary distance estimation under heterogeneous substitution pattern among lineages // Molecular Biol. Evolution. 2002. Vol. 19. P. 1727–1736.
- Vlasenko V.A. Ecological characteristics of Bracket Fungi in the forest steppe of Western Siberia // Contempor. Probl. Ecol. 2013. Vol. 6, № 4. P. 390–395.
Supplementary files
